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技術知識

如何更好的使用色譜柱

發布時間: 2019-01-21 14:37   7358 次瀏覽

1、拿到色譜柱后先閱讀(du)說(shuo)明書,了解色(se)譜柱(zhu)(zhu)的具體性能:耐(nai)受溫度、耐(nai)受PH等。以及色(se)譜柱(zhu)(zhu)的沖洗和保存條(tiao)件。經(jing)過柱(zhu)(zhu)校測試(shi)確認色(se)譜柱(zhu)(zhu)本身(shen)沒有(you)問(wen)題后方可正常使用(yong)。


2、樣品充分前處理,確保樣品的(de)潔凈;使用(yong)保護柱或在線過濾(lv)(lv)器,根據實際情況更換(huan)保護柱芯或濾(lv)(lv)片(pian)。


3、避(bi)免壓力(li)和(he)溫度的(de)急劇(ju)變化及任何機械震動。


4、應逐漸(jian)改變溶劑的組成,特別是(shi)反相色譜中如(ru)果流動相中使用了(le)緩沖鹽,避免出現(xian)鹽析。



5、選擇使用適宜的流動相(xiang)(尤其是PH),以(yi)避免固(gu)定相(xiang)被破壞,PH過低(di)共價鍵(jian)斷裂,鍵(jian)和相(xiang)水(shui)解;PH過高硅膠溶解。


6、色(se)譜柱使用過程中,如果壓力升(sheng)高,或(huo)出現污染,選(xuan)擇適當的條件沖洗或(huo)反沖。

 

適用于C18、C8、C4、C1、苯基(ji)、PFP、AQ等(deng)

使用(yong)至少(shao)20倍(bei)柱(zhu)(zhu)體(ti)積(ji)的(de)(de)含有(you)≥30%誰的(de)(de)極性(xing)(xing)郵(you)寄溶(rong)劑(如乙腈)作為流動相除去柱(zhu)(zhu)子(zi)中的(de)(de)緩沖鹽;使用(yong)至少(shao)20倍(bei)柱(zhu)(zhu)體(ti)積(ji)的(de)(de)含有(you)95%極性(xing)(xing)郵(you)寄溶(rong)劑(如乙腈)沖洗色譜柱(zhu)(zhu)。


污染物(wu)的去除(chu)常規星期后柱(zhu)校沒有(you)明顯(xian)恢(hui)復(fu)時,使用(yong)50%異丙醇/乙(yi)腈以低流速(su)清洗(xi)20倍(bei)柱(zhu)體積以除(chu)去污染物(wu)。(以上操作可(ke)根(gen)據實驗室自身(shen)SOP視(shi)情況而定,此方法僅(jin)為賽分針(zhen)對自己品牌的反相色譜柱(zhu)沖洗(xi)的參考意見)


適(shi)用于氨基柱(zhu)、氰基柱(zhu)

常規清洗:乙腈:水(shui)=60:40條件對色譜柱進行沖洗,清洗時不建議水(shui)相(xiang)比例超過40%,過高使用水(shui)相(xiang)容易導致鍵和(he)相(xiang)水(shui)解。


色譜柱再(zai)生(sheng)(sheng):當(dang)色譜柱經過(guo)長期(qi)使(shi)用,柱校(xiao)降(jiang)低(di)時,可以對色譜柱進(jin)行再(zai)生(sheng)(sheng),乙腈:水(shui)(水(shui)中加入0.05%氨水(shui))=60:40條件沖(chong)洗30倍(bei)柱體積。(以上操作可根(gen)據實驗室自(zi)身SOP視情況而(er)定,此(ci)方法僅為賽分針(zhen)對自(zi)己品牌的色譜柱沖(chong)洗的參(can)考(kao)意見)

 

適用于離(li)子交換柱(zhu)SCX、SAX沖洗方法(fa)

日常沖(chong)(chong)洗:用****水沖(chong)(chong)洗30個(ge)(ge)柱體(ti)積除鹽(yan),然后用20%甲醇或乙腈沖(chong)(chong)洗20個(ge)(ge)柱體(ti)積后保存(cun)在20%甲醇或乙腈中(zhong)。


長(chang)期(qi)保存:用(yong)****水(shui)沖(chong)洗(xi)30個(ge)(ge)柱體積(ji)去(qu)除鹽,然后用(yong)50%乙腈(jing);50%水(shui)沖(chong)洗(xi)20個(ge)(ge)柱體積(ji)后保存在50%乙腈(jing):50%水(shui)中(zhong)。


再生:先用(yong)(yong)(yong)高濃度的緩沖(chong)鹽(不超過1M),然后再用(yong)(yong)(yong)****水洗(xi)(xi),****乙腈或(huo)甲醇沖(chong)洗(xi)(xi),再用(yong)(yong)(yong)20%乙腈或(huo)甲醇保存。(以上(shang)操作(zuo)可(ke)根據實(shi)驗室自身SOP視情況而定,此方(fang)法僅為賽分針對(dui)自己品牌的色譜柱(zhu)沖(chong)洗(xi)(xi)的參考(kao)意(yi)見)



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